流式點陣儀的分類
流式點陣儀按照激發(fā)光源的類型可分為激光流式點陣儀和燈管流式點陣儀。
按照探測方式可分為前散射、側(cè)散射和熒光三種。
按照參數(shù)測定的可分為單參數(shù)、雙參數(shù)和多參數(shù)。其中單參數(shù)只測量一個參數(shù),如細胞大小;雙參數(shù)可同時測量兩個參數(shù),如大小和復雜度;多參數(shù)可以同時測量三個或以上的參數(shù),如大小、復雜度和細胞表面分子的表達。
還有一些特殊的流式點陣儀,如時間飛行質(zhì)譜儀(TOF-MS)和打孔式流式點陣儀等。
流式點陣儀的作用用途
流式點陣儀生化實驗儀器,可以對單個生物細胞進行分析和測定。它的作用和用途如下:
1. 定量分析:可以對樣品中的特定成分進行定量分析,例如檢測血液中白細胞或腫瘤細胞的濃度。
2. 分選篩選:可以通過細胞表面標記分選篩選出具有特定生物學特性的細胞亞群進行后續(xù)的研究。
3. 單細胞分析:可以對單個細胞進行復雜的檢測和分析,例如測定單細胞的基因表達譜、代謝物水平、蛋白質(zhì)組成和功能等。
4. 研究細胞動態(tài):可以通過對大量細胞的連續(xù)監(jiān)測和跟蹤,研究細胞的生長、分裂和死亡等動態(tài)過程。
5. 控制細胞實驗條件:通過在流式點陣儀中控制光源、溫度和流速等參數(shù),可以為細胞實驗提供一個穩(wěn)定的環(huán)境和條件。
流式點陣儀的使用方法
1. 準備流式細胞懸液:將細胞懸液經(jīng)過離心收集細胞,再用生理鹽水或PBS等溶液洗滌細胞,使細胞濃度適宜(一般在1×10^6 ~ 1×10^8個/mL之間),并加入染色劑(如PI、FITC等)或抗體等,混合均勻。
2. 調(diào)試儀器:打開流式點陣儀電源,啟動軟件,進行設(shè)備校準、光源校準等工作。
3. 標定:將標準顆粒懸浮液放入樣品管中,進行儀器的標定,得到標準值。
4. 開始檢測:取少量細胞懸液加入樣品管,使樣品均勻。打開激光光源,調(diào)節(jié)合適的流速,將樣品連續(xù)流動進入檢測室。儀器通過激光和光電多道檢測器對細胞的熒光強度、散射光等進行分析,得到細胞數(shù)量和熒光表達程度等信息。
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